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1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
2酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本s和陰性對照n的 od值后,計算s/n值。s/n***2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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elisa試劑盒用戶:買同一個指標(biāo)的幾個盒子,用不用都做標(biāo)準(zhǔn)曲線? 江萊生物解答:如果同一個指標(biāo)買了4個,建議每盒都做個標(biāo)曲。同一個盒子,即使分幾次用,做一個標(biāo)曲也行了,因為數(shù)值不會偏差太大。
elisa試劑盒用戶:樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎? 江萊生物解答:可以的,直接加40μl就可以了。
elisa試劑盒用戶:樣本怎么保存? 江萊生物解答:當(dāng)天要用的樣本保存4℃。隔天樣本-20℃近期一個月左右要用的樣本, 長期保存樣本-70℃一年或者更長時間多久都可以用避免反復(fù)凍融。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒價格---?江萊生物解答:elisa試劑盒價格有幾百到幾千不等,關(guān)鍵看種類,品質(zhì),靈敏性,以及經(jīng)費,選擇合適自己的,-的才是硬道理
elisa試劑盒用戶:13個elisa試劑盒要做多久?江萊生物解答:看你做多少個樣本,你買的規(guī)格是哪種,一般96t的盒子做85個樣,48t做37個樣。
elisa試劑盒用戶:96t可以檢測多少個樣本?48t可以檢測多少個樣本? 江萊生物解答:96t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測85個樣本,其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。96t單孔可以檢測90個樣本,7個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。48t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測37個樣本,其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。48t單孔可以檢測40個樣本,7個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照
elisa試劑盒用戶:進口elisa試劑盒好還是國產(chǎn)elisa試劑盒好?江萊生物解答:都好 看自己實驗經(jīng)費決定了 充足呢 就用進口elisa試劑盒 不充足呢就用國產(chǎn)elisa試劑盒。
elisa試劑盒用戶:那我們算出來的ach含量為什么出現(xiàn)負(fù)值? 江萊生物解答:說明個別樣本的濃度很低,當(dāng)濃度接近第6個點的時候,直線方程就有可能計算出負(fù)值。
elisa試劑盒用戶:標(biāo)準(zhǔn)的檢測85個樣本和單孔相比,有什么好的地方? 江萊生物解答:標(biāo)準(zhǔn)的檢測又叫復(fù)孔檢測,標(biāo)準(zhǔn)的檢驗重復(fù)性測的結(jié)果好,大家都叫復(fù)孔是標(biāo)準(zhǔn)的檢測。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒被放在了常溫怎么辦?江萊生物解答:應(yīng)該保存在2-8℃ 低溫。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒檢測范圍什么意思? 江萊生物解答:比如試劑盒檢測蛋白質(zhì)的濃度范圍是10--100nmol/ml,而你的三個樣品濃度為100,200,和300.那么你檢測到的數(shù)值是一樣的,都是試劑盒檢測的值100。
elisa試劑盒用戶:人和肽素copeptinelisa洗滌液是濃縮的;是一次配好,還是現(xiàn)配現(xiàn)用? 江萊生物解答:濃縮的,現(xiàn)配現(xiàn)用的。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒中48t和96t的區(qū)別是什么? 江萊生物解答:48t和96t代表試劑盒的規(guī)格;48t意思是48孔;96t意思是96孔
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒都可以通過什么儀器使用? 江萊生物解答:1、elisa試劑盒都可以通過酶標(biāo)儀使用。 2、酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀是酶聯(lián)免疫吸附試驗的-儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其-都是一個比色計,即用比色法來進行分析。 測定一般要求測試液的終體積在250μl以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒是檢測含量還是生物活性?江萊生物解答:elisa檢測的是抗原的空間結(jié)構(gòu)的抗原性,并不代表活性,細胞因子的活性測定有另外專門的實驗方法,需要培養(yǎng)細胞因子的敏感細胞,根據(jù)細胞的生理變化而確定細胞因子的生物學(xué)活性.