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1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
2酶標板置4℃,包被過夜。
3洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數據處理:在得出標本s和陰性對照n的 od值后,計算s/n值。s/n***2.1為陽性判定標準。
牛c9檢測試劑盒基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本測定其中的抗體或抗原與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率---,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到---的敏感度。 elisa可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
豬高密度脂蛋白膽固醇(hdl-c)elisa試劑盒
大鼠---結合蛋白4(igfbp-4)elisa試劑盒
大鼠高分子量細胞角蛋白(ck-hmw)elisa試劑盒
小鼠smad同源物4(smad4)elisa試劑盒
人巨噬細胞移動因子(mif)elisa試劑盒
豬抗髓鞘相關糖蛋白抗體(magab)elisa試劑盒
小鼠pim-3原癌基因(pim3)elisa試劑盒
人脂肪酸elisa試劑盒
大鼠凝血因子xiii(f13)elisa試劑盒
牛25---d3(25hvd3)elisa試劑盒
牛緊密連接蛋白(occludin)elisa試劑盒
牛骨骼肌慢肌肌鈣蛋白i(tnni1)elisa試劑盒
人富含半胱氨酸型酸性蛋白(sparc)elisa試劑盒
兔血清淀粉樣蛋白a3(saa3)elisa試劑盒
魚蛋白激酶劑γ(pkiγ)elisa試劑盒
雞α1微球蛋白/bikunin前體(ambp)elisa試劑盒
豬細胞色素c(cyt-c)elisa試劑盒
兔粒細胞趨化蛋白2(gcp-2)elisa試劑盒
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犬白細胞介素2(il-2)elisa試劑盒
牛kb激酶劑β(ikbkβ)elisa試劑盒
牛fms相關的酪氨酸激酶4(flt4)elisa試劑盒
大鼠vegf共調節趨化因子1(vcc1)elisa試劑盒
人水蛭素(hirudin)elisa試劑盒
牛α甲胎蛋白小扁豆凝集素3(αfpl3)elisa試劑盒
小鼠透明質酸酶(haase)elisa試劑盒
魚細胞表面粘蛋白16(muc16)elisa試劑盒
雞早期生長反應因子2(egr2)elisa試劑盒
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犬---結合蛋白3(igfbp3)elisa試劑盒
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