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1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
2酶標板置4℃,包被過夜。
3洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數據處理:在得出標本s和陰性對照n的 od值后,計算s/n值。s/n***2.1為陽性判定標準。
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elisa試劑盒用戶:一個空需要多少量的血清? 江萊生物解答:一個孔上樣量10-50微升。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒中48t和96t的區別是什么? 江萊生物解答:48t和96t代表試劑盒的規格;48t意思是48孔;96t意思是96孔
elisa試劑盒用戶:我想elisa試劑盒用戶一下,標準品濃度與標準品吸光度值之間是不是線性回歸?檢測出來的吸光度很低一般都存在哪些原因?大部分在0.08左右?大鼠5羥色胺5-htelisa試劑盒 江萊生物解答:是線性回歸。檢測出來的值比較低,樣本、稀釋、操作等,原因很多,但只要在可操作范圍就行。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒的使用的方法是什么啊? 江萊生物解答:采用雙抗夾心法目前暫行
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒怎么---在有效期之內呢?難道隔一段時間去核查一下?江萊生物解答:elisa試劑盒一般上面都會寫明保存條件和保存時間,如果超過期限就表示不能用了,如果非要確定可不可以用,那就要對抗體重新做效價。
elisa試劑盒用戶:樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎? 江萊生物解答:可以的,直接加40μl就可以了。
elisa試劑盒用戶:樣本怎么保存? 江萊生物解答:當天要用的樣本保存4℃。隔天樣本-20℃近期一個月左右要用的樣本, 長期保存樣本-70℃一年或者更長時間多久都可以用避免反復凍融。
elisa試劑盒用戶:買同一個指標的幾個盒子,用不用都做標準曲線? 江萊生物解答:如果同一個指標買了4個,建議每盒都做個標曲。同一個盒子,即使分幾次用,做一個標曲也行了,因為數值不會偏差太大。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒價格是多少?江萊生物解答:elisa試劑盒價格有幾百到幾千不等,關鍵看種類,品質,靈敏性,以及經費,選擇合適自己的,---的才是硬道理
elisa試劑盒用戶:13個elisa試劑盒要做多久?江萊生物解答:看你做多少個樣本,你買的規格是哪種,一般96t的盒子做85個樣,48t做37個樣。
elisa試劑盒用戶:96t可以檢測多少個樣本?48t可以檢測多少個樣本? 江萊生物解答:96t標準的可以檢測85個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。96t單孔可以檢測90個樣本,7個標準品孔,1個空白對照。48t標準的可以檢測37個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。48t單孔可以檢測40個樣本,7個標準品孔,1個空白對照
elisa試劑盒用戶:進口elisa試劑盒好還是國產elisa試劑盒好?江萊生物解答:都好 看自己實驗經費決定了 充足呢 就用進口elisa試劑盒 不充足呢就用國產elisa試劑盒。
elisa試劑盒用戶:那我們算出來的ach含量為什么出現負值? 江萊生物解答:說明個別樣本的濃度很低,當濃度接近第6個點的時候,直線方程就有可能計算出負值。
elisa試劑盒用戶:標準的檢測85個樣本和單孔相比,有什么好的地方? 江萊生物解答:標準的檢測又叫復孔檢測,標準的檢驗重復性測的結果好,大家都叫復孔是標準的檢測。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒被放在了常溫怎么辦?江萊生物解答:應該保存在2-8℃ 低溫。