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1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
2酶標板置4℃，包被過夜。
3洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后，即甩去，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
6洗板，同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
9洗板，同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，終測得的od值為兩者之差w1-w2，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數據處理：在得出標本s和陰性對照n的 od值后，計算s/n值。s/n***2.1為陽性判定標準。
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elisa試劑盒用戶：未處理的樣本我需要郵寄多少的量？ 江萊生物解答：每個孔需要100ul。
elisa試劑盒用戶：elisa試劑盒只能用于純研究是什么意思？江萊生物解答：elisa試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷 檢測原理 ： 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗elisa。
elisa試劑盒用戶：人睪酮(t)elisa試劑盒，人雌三醇(e3)elisa試劑盒。是用什么酶標記的？ 江萊生物解答：辣根酶標記，標本里不能加化鈉。
elisa試劑盒用戶：一個空需要多少量的血清？ 江萊生物解答：一個孔上樣量10-50微升。
elisa試劑盒用戶：人或鼠的elisa試劑盒可用于豬的檢測嗎？江萊生物解答：詢問一下試劑盒提供廠家對于目標檢測分子，不同種屬的交叉反應效果。一般，人與豬，小鼠與豬之間的交叉反應概率并不高。
elisa試劑盒用戶：人和肽素copeptinelisa試劑盒檢測的時候需要在操靜臺中操作嗎，還是在外面操作就可以了，謝謝 江萊生物解答：要求不是很嚴格，根據自己實驗室的設備而定，都可以。
elisa試劑盒用戶：是不是空白對照就是什么都不加？ 江萊生物解答：不加樣本 不加樣本稀釋液 不加酶標試劑 其他的都可以加。
elisa試劑盒用戶：收集血清的時候用什么管？ 江萊生物解答：普通離心管就可以。
elisa試劑盒用戶：做出來的結果：標準品的吸光度呈線性回歸，但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近，正常未予-的大鼠血漿都基本沒有5-ht表達，這是什么原因？ 江萊生物解答：原因是：樣本、稀釋、室控和機器操作等，原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近。
elisa試劑盒用戶：elisa試劑盒的使用的方法是什么啊？ 江萊生物解答：采用雙抗夾心法目前暫行
elisa試劑盒用戶：我想elisa試劑盒用戶一下，標準品濃度與標準品吸光度值之間是不是線性回歸？檢測出來的吸光度很低一般都存在哪些原因？大部分在0.08左右？大鼠5羥色胺5-htelisa試劑盒 江萊生物解答：是線性回歸。檢測出來的值比較低，樣本、稀釋、操作等，原因很多，但只要在可操作范圍就行。
elisa試劑盒用戶：elisa試劑盒怎么-在有效期之內呢?難道隔一段時間去核查一下?江萊生物解答：elisa試劑盒一般上面都會寫明保存條件和保存時間,如果超過期限就表示不能用了,如果非要確定可不可以用,那就要對抗體重新做效價。
elisa試劑盒用戶：樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎？ 江萊生物解答：可以的，直接加40μl就可以了。
elisa試劑盒用戶：樣本怎么保存？ 江萊生物解答：當天要用的樣本保存4℃。隔天樣本-20℃近期一個月左右要用的樣本， 長期保存樣本-70℃一年或者更長時間多久都可以用避免反復凍融。
elisa試劑盒用戶：買同一個指標的幾個盒子，用不用都做標準曲線？ 江萊生物解答：如果同一個指標買了4個，建議每盒都做個標曲。同一個盒子，即使分幾次用，做一個標曲也行了，因為數值不會偏差太大。
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