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1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
2酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本s和陰性對照n的 od值后,計(jì)算s/n值。s/n***2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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elisa試劑盒用戶:酶標(biāo)板不平,影響結(jié)果嗎? 江萊生物解答:不影響結(jié)果。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒是否可以重復(fù)用?江萊生物解答:試劑盒不可以重復(fù)用的,因?yàn)榘蹇咨系目贵w做過一次之后就已經(jīng)結(jié)合掉了,要重復(fù)做的話,肯定只能買新的試劑盒。至于說穩(wěn)定性差,我個(gè)人認(rèn)為不是手法問題,因?yàn)樵噭┖性诖罅坎僮鞯臅r(shí)候是比較簡單的,起碼在同一個(gè)人操作的時(shí)候,一般不會出現(xiàn)太大的偏差。
elisa試劑盒用戶:生物試劑與elisa試劑盒的分別不同在哪?江萊生物解答:elisa試劑盒就是把該實(shí)驗(yàn)需要的試劑按一定用量和比例組合起來的成品.一般都是按做多少次的用量包裝.生物試劑那就多了,包裝大小也五花八門.
elisa試劑盒用戶:一個(gè)空需要多少量的血清? 江萊生物解答:一個(gè)孔上樣量10-50微升。
elisa試劑盒用戶:人或鼠的elisa試劑盒可用于豬的檢測嗎?江萊生物解答:---詢問一下試劑盒提供廠家對于目標(biāo)檢測分子,不同種屬的交叉反應(yīng)效果。一般,人與豬,小鼠與豬之間的交叉反應(yīng)概率并不高。
elisa試劑盒用戶:人和肽素copeptinelisa試劑盒檢測的時(shí)候需要在操靜臺中操作嗎,還是在外面操作就可以了,謝謝 江萊生物解答:要求不是很嚴(yán)格,根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備而定,都可以。
elisa試劑盒用戶:人睪酮(t)elisa試劑盒,人雌三醇(e3)elisa試劑盒。是用什么酶標(biāo)記的? 江萊生物解答:辣根酶標(biāo)記,標(biāo)本里不能加化鈉。
elisa試劑盒用戶:未處理的樣本我需要郵寄多少的量? 江萊生物解答:每個(gè)孔需要100ul。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒只能用于純研究是什么意思?江萊生物解答:elisa試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷 檢測原理 : 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)elisa。
elisa試劑盒用戶:收集血清的時(shí)候用什么管? 江萊生物解答:普通離心管就可以。
elisa試劑盒用戶:做出來的結(jié)果:標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度呈線性回歸,但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,正常未予-的大鼠血漿都基本沒有5-ht表達(dá),這是什么原因? 江萊生物解答:原因是:樣本、稀釋、室控和機(jī)器操作等,原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近。
elisa試劑盒用戶:是不是空白對照就是什么都不加? 江萊生物解答:不加樣本 不加樣本稀釋液 不加酶標(biāo)試劑 其他的都可以加。
elisa試劑盒用戶:我想elisa試劑盒用戶一下,標(biāo)準(zhǔn)品濃度與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值之間是不是線性回歸?檢測出來的吸光度很低一般都存在哪些原因?大部分在0.08左右?大鼠5羥色胺5-htelisa試劑盒 江萊生物解答:是線性回歸。檢測出來的值比較低,樣本、稀釋、操作等,原因很多,但只要在可操作范圍就行。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒怎么---在有效期之內(nèi)呢?難道隔一段時(shí)間去核查一下?江萊生物解答:elisa試劑盒一般上面都會寫明保存條件和保存時(shí)間,如果超過期限就表示不能用了,如果非要確定可不可以用,那就要對抗體重新做效價(jià)。
elisa試劑盒用戶:elisa試劑盒的使用的方法是什么啊? 江萊生物解答:采用雙抗夾心法目前暫行