上海雅心生物技術有限公司為您提供重組腸激酶ek08雅心生物。重組腸激酶
cat.no.: rek08
cas: 9017-74-8
ec: 3.4.21.9
儲存溫度:-20℃或以下
來源:重組牛腸激酶,大腸桿菌表達
蛋白序列:---酸序列與牛腸激酶輕鏈一致。
1.產品簡介
雅心重組牛腸激酶是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段。該酶經hplc純化,純度高,特---高,不含其他蛋白酶。腸激酶可以切割含有四個天冬氨酸的賴氨酸羧基端肽鍵:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 賴氨酸ddddk。可以在較寬ph范圍4.5-9.5和較寬溫度范圍內有效切割融合蛋白。腸激酶可去除位于蛋白質n-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標簽。
2.產品特性
來源 重組大腸桿菌
外觀 澄清、無色至淡黃色液體
活性 *** 5.0 u/μl
純度蛋白電泳 單一主條帶
電泳分子量 25.8 ±2.6 kda
單位定義:1u定義為在25℃,12h~16h之內,將0.5mg保存于25mm tris-hcl 8.0 緩沖液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。
3.-使用方法
125℃酶切條件:
按照酶活性定義,酶切條件舉例:
25mm tris-hcl 8.0體系中:
融合蛋白 0.1-1mg/ml蛋白總量50-100μg
重組ek 0.1-0.2u
25℃過夜酶切,或完全酶切需16-24h,用sds-page
檢測酶切---。
24℃低溫酶切條件:
4℃能對底物進行有效酶切,但需要將酶切時間延長至48-64h,或增加2-3倍酶量。
3酶切優化和放大
優化:可以對酶切條件進行優化,例如緩沖液ph,融合蛋白濃度,ek的量,以及酶切時間,使融合蛋白能在穩定條件下被酶切,用sds-page檢測酶切---。
放大:選擇優化后的反應條件,按該條件等比例放大,用sds-page檢測酶切---。
4去除重組腸激酶的方法:使用胰蛋白酶---親和層析例如sigma t0637去除重組腸激酶。
5注意:不建議37℃條件下酶切,可能會有非特---酶切出現。
4.常見影響腸激酶活性的因素
在>200mm 咪唑,或>200mmnacl,或>5%甘油,酶切---受影響。可參照以下-方法進行酶切:
1為獲得理想酶切結果,請將樣品透析到25mm tris-hcl 8.0緩沖液中,再進行酶切。
2若不便透析,可將樣品稀釋,咪唑含量在100mm以下,nacl濃度在50mm以下,甘油濃度小于5%以下進行酶切,酶的用量與蛋白的比例不變即1u酶切500μg蛋白。
3如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種,且不便去除,此時適當增加酶量或延長酶切時間,也可達到較好酶切---。
5.儲存和運輸穩定性
酶液儲存穩定性:-20℃,24個月穩定;25℃,一周內,無活性損失。緩沖體系:50mm tris-hcl,ph8.0,250mm nacl,2mmca2+,50%甘油。
酶液反復凍融穩定性:反復凍融5次,無活性損失。
運輸穩定性:藍冰保溫運輸,穩定。
6.產品優勢
特---:特定的蛋白酶,切割前面含有四個天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 賴氨酸 (d-d-d-d-k)。
純度高:不含其他蛋白酶,無非特---切割。
無動物源性:重組生產,無外源性的---污染,生產過程不使用任何動物源原料。
穩定:批量生產,可-穩定連續的批次生產;產品批次間無差異,穩定。
符---規要求:生產設備和生產環境符合相關法規要求,生產過程完全遵循nsf iso 9001:2015體系并符合---指導原則。
文件完整:按客戶需求,可提供相關法規支持文件。
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